PCR

L'amplification se fait sur 10 µL de prélèvement avec 10 pmol d'amorces APOB1 et APO B2 et 1 unité de Taq polymérase selon le programme suivant :
 
Nombre de cycles
Étape
Température (°C)
Durée (secondes)
X 1
dénaturation 94 120
hybridation 44 30
élongation 72 45
X 30
dénaturation 94 10
hybridation 44 30
élongation 72 45
 
Tube PCR : l'huile minérale permet d'éviter l'évaporation
Tube PCR : une goutte d'huile minérale (phase supérieure) est nécessaire pour éviter l'évaporation de l'eau et la concentration des réactifs.
 


Thermocycleur : dans ce modèle, le chauffage est assuré par une lampe et le refroidissement est assuré par un ventilateur.
La température est contrôlée par un thermocouple placé dans un tube PCR lui même inséré dans la platine chauffante.

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